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白木香种子挥发油的化学成分及抗菌活性研究

放大字体  缩小字体 发布日期:2014-11-28  浏览次数:431
核心提示:瑞香科白木香Aquila ria sinensis (Lour1) Gilg是生产药用沉香的植物资源,为我国特有的珍贵植物〔1〕。沉香作为名贵的香料和药材
 瑞香科白木香Aquila ria sinensis (Lour1) Gilg是生产药用沉香的植物资源,为我国特有的珍贵植物〔1〕。沉香作为名贵的香料和药材自古以来就得到广泛的应用。天然白木香由于长期采伐,资源已经越来越少,现多采自人工种植。白木香树每年产大量种子,近年来随着白木香种植面积的不断扩大,其种子资源日渐丰富。目前白木香种子只有少部分用于育苗,其资源未得到有效开发利用。
长期以来由于抗生素的广泛使用甚至滥用,导致耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin2resistantS taphy lococcus aureus, MRSA) 等耐药菌株的出现。MRSA对临床上广泛应用的多种抗生素耐药,致感染治疗困难,病死率高,已成为全世界范围内抗感染中的难题。因而解决MRSA 耐药性问题已经成为当今医药界的重要任务。本研究组在海南热带药用植物抗MRSA活性筛选过程中,发现白木香种子挥发油显示了一定的抗MRSA活性,并通过GC2MS 技术分析测定了白木香种子挥发油的化学成分。
 
1  材料与方法
111  材料 白木香种子样品于2006年6月采于文昌沉香种植基地。由中国热带农业科学院热带生物技术研究所戴正福副研究员鉴定。凭证标本(No1 AS200606)存放于中国热带农业科学院热带生物技术研究所。
 
 
112  仪器与试剂 气相色谱质谱联用仪为美国惠普公司的HP6890 /5973GC /MS联用仪。色谱柱为HP25MS 5% Phenyl Methyl Siloxane ( 3010 m ×250μm ×0125μm)弹性石英毛细管柱。减压浓缩使用Buchi Rotavapof R2200 旋转蒸发仪; 硫酸卡那霉素(上海生工有限公司) ;氟康唑(贵州科伦药业有限公司,批号: A050314204) ;其他试剂均为分析纯。
 
113  样品处理 晒干种子样品5716 g,经粉碎后用石油醚浸提三次,每次用超声波提取15 min,合并石油醚提取液,回收石油醚后得到黄色透明油状物1219 g,得率为2215%。
 
114  GC2MS分析条件 程序升温:柱温50℃,保留1 min, 5℃/min升温至280℃,保持20 min,气化室温度250℃。载气为高纯He ( 991999% ) ;柱前压5108 p si,载气流量210 ml/min;进样量1μl (丙酮溶液) ;分流比40∶1。 离子源为E I源,离子源温度230℃; 四级杆温度150℃;电子能量70 eV;发射电流3416μA;倍增器电压1871 V;接口温度280℃;质量扫描范围为10 ~550 amu。
 
115  菌株与培养基 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌955(methicillin2resistant S taphylococcus aureus, MR2SA)由中国热带农业科学院热带生物技术研究所保藏;白色念珠菌Cand ida albicans购于海南省药品检验所。MRSA采用牛肉膏蛋白胨培养基〔3〕:牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂20 g,定容至1L, pH710~712, 1 ×105 Pa灭菌20 min;白色念珠菌采用YPD培养基〔4〕:葡萄糖20 g,胰蛋白胨20 g,酵母粉 10 g,琼脂20 g,定容至1L, pH 710, 1 ×105 Pa灭菌20 min。
 
 
116  抗菌活性的测定〔5〕 将种子挥发油配成浓度为50 mg/ml的样品溶液,选用直径为6 mm的灭菌滤纸片,滤纸片分别加样品溶液50、60、70μl,每个梯度重复三次,待溶剂挥干后,将已点样的滤纸片贴于已涂供试菌悬液100μl (菌液浓度105 ~107 cfu /ml)的琼脂培养基上,放置20 min后,再放入培养箱37℃无光照培养, 24 h后测其抑菌圈大小。MRSA以硫酸卡那霉素作为阳性对照,白色念珠菌以氟康唑作为阳性对照。
 
2  结果
211  GC2MS分析结果 通过HPMSD 化学工作站,结果Nist 2005标准质谱图库和W ILEY275质谱图库进行鉴定,采用峰面积归一化法计算相对含量。
 
 
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